Обзор имеющихся по этой теме сообщений показывает, что за небольшим исключением соединения, полученные путем биоконверсии, менее активны, чем исходные вещества. В то же время некоторые продукты трансформации (такие, как б-аминопенициллано-пая кислота) являются очень подходящим «строительным материалом» при получении полусинтетических антибиотиков. Непосредственные продукты биологической трансформации, как правило, не находят себе применения.
Однако в комплексе эти вещества более активны и, как правило, обладают бактерицидным действием. Некоторые из этих препаратов широко используются в Европе, особенно виргиниямицин и пристинамицин для перорального применения. Они оказались исключительно активными против стафилококков и довольно успешно применяются при таких тяжелых стафилококковых инфекциях, как остеомиелиты. Кроме того, виргиниямицин применяют как добавку к корму.
Первые данные о взаимосвязи между фолиевой и фолиновой кислотами были получены в исследованиях Зауберлиха [82], который установил повышенное выделение фолиновой кислоты после введения фолиевой кислоты. В другой работе, проведенной на срезах печенки крысы, был сделан вывод о прохождении в
Уровень синергизма в определенной степени зависит также от конкретного препарата сульфонамида, он слабее проявляется в присутствии малоактивных препаратов.
Будет ли данное сочетание препаратов бактерицидным in vivo, неизвестно. Ясно одно, что это сочетание высокоэффективно при лечении многих инфекций, а обладает ли оно бактерицидным действием, это не главное для антибактериального препарата при его использовании с лечебными целями. Хотя очищение от инфекции и означает гибель вторгшегося микроорганизма, в действительности редко удается определить роль, которую выполняет антибактериальный препарат при уничтожении микробов, и естественные защитные механизмы хозяина.
Как и можно было ожидать, их. защитное действие не зависит от введения фолиновой кислоты [13, 46] или тимидина [20], так как из обычных патогенов только Sir. faecalis может использовать готовые фолаты, а тимидин быстро выводится из организма, и его концентрация в крови и моче составляет менее 0,05 мкг/мл [96].
Влияние комбинации препаратов на появление резистентных мутантов
Постепенно антибактериальные препараты стали использовать в комбинациях, особенно при лечении туберкулеза, с целью уменьшения скорости появления резистентных мутантов.
ТМП и сульфонамидрезистентные штаммы
Рациональность применения комбинации ТМП + СМЗ зависит от сульфонамида, который уменьшает количество дигидрофолата, синтезируемого заражающим микроорганизмом. Это, в свою очередь, приводит к снижению количества ТМП, необходимого для подавления роста микробов, за счет блокирования превращения фолатов в их активную форму. Поэтому целесообразность применения этой комбинации будет зависить от чувствительности конкретного микроорганизма к СМЗ, однако чувствительность в данном случае следует отличать от чувствительности к одному сульфонамиду.
сульфонамида, все же известно, что резистентные штаммы содержат измененные дигидроптероатсинтетазы. Так, у штамма Е. coli, ставшего резистентным к сульфонамидам в ходе
серийного пассирования, эти ферменты менее эффективно связывались с сульфонамидами, чем ферменты исходного штамма [77]. Установлено, что штаммы с генами или плазмидами резистентности к сульфонамиду имеют два сходных фермента. Одним и» этих ферментов является фермент, обнаруживаемый в чувствительных штаммах.
Он установил, что сульфона-миды значительно усиливают подавляющее действие ТМП на штамм Streptococcus faecalis, который обычно считается индифферентным к присутствию СМЗ. Аналогичные результаты, были получены в опытах с двумя сульфонамидрезистентными штаммами Е. coli (табл. 5.3).
Стимулирующее действие СМЗ также удалось показать методом диффузии. Хотя на пластинке, для определения чувствительности к сульфонамиду вокруг диска зоны ингибирования Streptococcus faecalis не образовывались, все же вокруг диска, содержащего 23,75 мкг СМЗ j-f- 1,25 мкг ТМП, зоны ингибирования роста были
Аналогичные результаты были получены с сульфонамидрези-стентными штаммами Е.
Затем (по возрастанию мутности) измеряли время, которое требовалось для восстановления плотности культуры после ее разбавления бульоном без препарата. Таким образом, по величине времени, необходимого для восстановления плотности культуры, можно было установить любую разницу в антибактериальной активности между комбинацией и отдельными препаратами. Полученные результаты приведены в таблице 6.2.
При концентрациях препаратов, превышающих значения МИК, присутствие избытка СМЗ не приводило к увеличению времени восстановления плотности культуры после контакта с одним ТМП, более того, при суб-МИК-концентрациях было установлено небольшое дополнительное подавление роста.
Несмотря на неодобрение многих авторитетов, применение комбинации антибиотиков в клинической практике стало совершенно-обычным. В основе комбинированной терапии лежит идея расширения антибактериального спектра действия, причем во многих: случаях допускается возможность взаимодействия веществ, создающих тем самым синергидный эффект. Пенициллины часто комбинируют с другими антибиотиками, и в данном сообщении приведены примеры антибактериального синергидного действия комбинаций пенициллинов.
faecalis и ее повышение в комбинации с аминогликозидами достаточно детально показана на рисунке 7.1 при действии комбинаций амоксициллин -j- стрептомицин и амоксициллин + канамицин на стрепто-мицинорезистентный штамм Str. faecalis 816 (МИК стрептомицина > 5000 мкг/мл). Амоксициллин проявлял бактерицидную активность в концентрации 1,0 мкг/мл в течение первых 6 ч и снижал число живых клеток на 99,9 %, после чего происходило восстановление роста до видимого уровня.
Высокую эффективность бактерицидного действия низина на вегетативные клетки можно объяснить изменением поверхностного натяжения цитоплазматической мембраны, что приводит к нарушению клеточной проницаемости и как следствие этого к бактерио-лизису. Кроме того, низин может ин-гибировать синтез жестких структур клеточной ткани В. stearother-mophilus, что было установлено при изучении ингибиторов синтеза пеп-тидогликанов [87].
Кроме того, влияние активности воды на восстановление после нагревания зависело от вида тест-микроба: так, в опыте с использованием метода нагревание — восстановление Salmonella senftenberg не зависело от уменьшения активности воды. Другие ученые исследовали двойное действие стресс-факторов: нагревания и рН [37], нагревания и протективных веществ [47], нагревания и химических веществ [67], нагревания, величины рН и концентрации NaCl [70], причем каждый фактор раздельно и в комбинации.
Приведенные результаты тем не менее оказались не столь однозначными, как у Других авторов [6], когда из 89 выделенных из сыра штаммов, вызывающих отравления, 64 были отнесены к бычьему фаготипу 42D. Сыр стилтон чаще всего перекладывается на ранней стадии созревания, однако источником стафилококков, о чем можно судить По умень-
шению их числа и набору фаготипов, могут быть выжившие микроорганизмы из сырого молока.
Штаммы культивировали в 10 % -ном разведенном сухом снятом молоке при температуре 22 °С в течение 6 дней при заражающей дозе 104 клеток/мл. Молоко было забуферено фосфатным буфером в диапазоне рН 5—6 с интервалом 0,2 единицы рН. Результаты опытов показали (табл. 10.3), что только штамм человеческого типа вызывает сдвиг рН. Во всех образцах при исходном рН выше 5,2 конечная величина рН варьировала, но не превышала значения 6,3.
coli, все же они не исключают токсичности и SO3 . Из приведенных результатов можно сделать следующий вывод: при данных значениях рН в бульоне, использованном в качестве среды в этих опытах (рис. 11.5 и 11.10), и, следовательно, в большинстве типов мяса и мясопродуктов, консервированных S02, концентрация свободной молекулярной двуокиси серы очень невелика.
Поэтому токсическим фактором, ответственным за наблюдаемое изменение микрофлоры в консервированных добавлением S02 сосисках, вероятно, является комбинация HSOJ и SO3 , не оказывающая значительного влияния на рост М.
В данной статье будут обобщены сведения о восстановлении (оживлении) микроорганизмов, поврежденных действием химических веществ и антибиотиков, а также будет рассмотрен ряд оригинальных работ по оживлению микроорганизмов, поврежденных этими веществами.
Эффективность применяемых антибактериальных веществ обычно оценивается только по количеству живых и мертвых микроорганизмов в общей популяции. Информация становится более подходящей, если подсчитать числа уцелевших клеток за определенные интервалы времени и отложить на графике десятичные логарифмы этих чисел против времени обработки, как это обычно делается при изучении динамики гибели популяции клеток, подвергнутых действию физических факторов, например нагревания.
Ферментативная инактивация была с успехом использована для некоторых пенициллинов и цефалоспоринов ((3-лактамов), однако при использовании |3-лактамаз следует проявлять внимание, так как не все |3-лактамазы разрушают любой (3-лактамный антибиотик. Лактамазы вырабатываются различными бактериями. Резистентность бактерий к другим антибиотикам, например к хлорамфениколу и некоторым аминогликозидам (стрептомицину), также может быть следствием выработки ферментов, разрушающих эти вещества.
новской концепции использования лечебных препаратов и антибактериальных кормовых добавок.
В соответствии с рекомендацией Шванновского комитета применяемые в качестве кормовых добавок антибактериальные вещества должны отвечать следующим требованиям:
1) давать экономическую выгоду при применении в животноводстве;
2) не должны совсем или крайне мало применяться как терапевтические препараты в медицине и ветеринарии;
3) не снижать эффективности предписанного лечебного антибиотика или антибиотиков в результате индуцирования резистентных штаммов микроорганизмов.
Отрицательные моменты при проведении профилактики в период лактации: 1) необходимо выявлять клиническую форму заболевания; 2) трудно контролировать длительность и эффективность лечения; 3) молоко необходимо выбраковывать (длительность такого периода варьирует); 4) зараженных коров необходимо содержать отдельно; 5) при стафилококковых инфекциях лечение относительно неэффективно.
Современная система содержания свиней, при которой не исключается контакт животных всех возрастных групп с бактериями, вирусами, микоплазмами и др.
Системы для борьбы с болезнями уже разработаны и проявляют свою высокую эффективность, особенно в случае метаболических и паразитарных болезней, если их применять со знанием дела. Однако в случае инфекционных болезней взаимосвязь между условиями среды, экологией инфекционных агентов и их хозяином-животным остается более сложной и, как правило, менее изученной. Меры борьбы, очевидно, нельзя считать абсолютно эффективными, если они базируются на предварительных данных, и в отдельных случаях наших знаний может оказаться совершенно недостаточно, чтобы разработать приемлемую систему борьбы с болезнями в настоящее время.
В действительности указанные условия создают не больше проблем для ветеринарного специалиста, чем необходимость ежедневно ставить немедленный диагноз клиническим симптомам, которые обнаруживаются при полном обследовании больного животного. Выбор антибиотика для каждого конкретного Случая основывается на учете разнообразных факторов, исходя из которых клиницисты делают заключение о данном заболевании и взаимосвязи его с окружающей средой.
В то же время, как отмечает Функе [12], с которым автор данной главы полностью согласен, мы не должны полностью полагаться на терапию в сухостойный период коров, искусственно маскируя и снижая требования к практике правильного содержания молочного скота.
В этой области у меня нет специальных знаний, однако, по мнению всех, кто занимался применением препаратов с этой целью, имеют значение следующие два обстоятельства: 1) пригодность коммерчески доступного препарата должна быть достаточно хорошо оценена в полевых условиях, а не только на основании опытов in vitro, как это часто бывает; 2) препарат должен быть недорогим.
Ингибирующий уровень пенициллина в пределах 1—16 ИЕ/мл теперь часто выражается в микрограммах, также далека от стандарта унификация методов определения резистентности. В Северной Ирландии применяют диски, содержащие 1,5 ИЕ, в Германии и Австрии—10 ИЕ, а в Нидерландах и Дании—1,0 ИЕ.
Количество стафилококков, резистентных к стрептомицину, также увеличилось, и, по данным Вилсона (личное сообщение) [49], оно зависит от масштабов применения антибиотика.
Но самое важное состоит в том, что после терапии в сухостойный период в большинстве стад появляются L-формы Strep, agalactiae, поэтому практика лечения коров в сухостойный период полусинтетическими пенициллинами, по мнению некоторых исследователей, должна быть пересмотрена [51].
Не менее важное значение приобретает знание экологии грамотрицательных бактерий, и почему именно условия их развития стали наиболее важным фактором за последние 6 лет.
Для этого штамма ЛДбо в опыте на телятах при пероральном заражении составила 5 X 108 микробных клеток. С целью получения стабильно высокой смертности, необходимой для сравнения режимов лечения на довольно небольших группах животных (максимально 35 телят), в опытах по химиотерапии для заражения применяли 100 ЛДбп. Стандартный курс лечения состоял из пяти ежедневных доз препарата; первую дозу вводили через 44 ч после заражения, так как к этому
времени почти у всех телят отмечались сильная лихорадка и тяжелые энтериты.
Мази должны выпускаться в форме, удобной для применения даже неквалифицированным персоналом, так как чаще всего они используются фермерами или скотоводами, а не ветеринарными врачами. Чаще других для введения антибиотиков применяют трубки с поршнем или шприцы, которые должны быть пригодны для наполнения препарата; в препарат не должны попадать токсические вещества, остающиеся после дезинфекции шприца.
По клиническим данным в 52 из 58 случаев (90 %) лечение оказалось успешным [2]. Таким образом, определение чувствительности с применением дисков, содержащих соответствующие комбинации антибиотиков, может более точно прогнозировать клинические результаты применения препаратов.
В этих же опытах 15 из 15 изолятов, резистентных к пенициллину и стрептомицину, взятых отдельно, оказались чувствительными к их комбинации, тогда как 5 из 23 микроорганизмов, чувствительных к обоим лекарствам по отдельности, не поддавались воздействию комбинированной терапии.
Вызываемое плесенью перегревание зерна имеет нежелательные последствия и требует значительных экономических затрат на проведение мер, предотвращающих порчу зерна. Спорадические случаи микозов и микотоксикозов у животных и людей обычно связаны с нарушением условий хранения зерна. Поражение плесенью может случиться при любой системе хранения зерна, однако влажное зерно из-за высокого содержания в нем влаги может быть более предрасположенным к воздействию микроорганизмов.
Скармливание обработанного зерна не влияет на состав молока, хотя ожидалось снижение его жирности, так как известно, что жирность молока снижается при скармливании кормов, которые повышают долю пропионовой кислоты по отношению ко всем кислотам рубца. Существует также мнение, что более тонкое измельчение других кормов, входящих в рацион, может оказать большее влияние на жирность молока, чем прямое добавление относительно небольшого количества пропионовой кислоты.
Результаты оценить оказалось трудно, так как не были выявлены взаимодействующие комбинации и не наблюдалось очевидного синергидного эффекта, например большего, чем для любого из трех наиболее эффективных препаратов: хлорамфеникола, стрептомицина и тетрациклина.
Несколько более усовершенствованный прием был использован Фишером при изучении 17 штаммов [1]. При этом 1мл 6-часовой культуры смешивали с 9 мл предназначенного для определения чувствительности диагностического агара фирмы «Оксоид» (DST СМ 261), охлаждали и оставляли при 4°С на 1 ч для диффузии антибиотиков.
Длительное пероральное введение антибиотиков создает исключительные условия для выработки резистентности к лекарственным препаратам. Кроме того, это способствует длительной персистенции резистентных штаммов после снятия селектирующего фона антибиотиков. Постоянный контакт с антибиотиками стабилизирует резистентные микроорганизмы и делает их частью обычной микрофлоры кишечника. Описанная ситуация у поросят и телят указывает на то, что постоянное (в течение многих лет) введение антибиотиков привело к возникновению резистентной микрофлоры, которая, без сомнения, передается из поколения в поколение, причем резистентные серотипы стабилизируются и чаще всего насыщают кишечную микрофлору.
Количество резистентных к антибиотикам форм Е. coli. Хотя резистентность к антибиотикам может передаваться всеми колиба-ктериями, однако культура Е. coli как отдельный вид была изучена по ряду причин. Во-первых, к этому виду относятся возбудители заболеваний человека и животных; во-вторых, что имеет особый практический смысл, возможность использовать метод серотипнрования для идентификации штаммов Е.
В то же время из одного образца кала от животных (телят, свиней и птицы) постоянно вы-
деляется множество О-серотипов бактерий (табл. 26.5). Поэтому животный резервуар штаммов не только богат R-детерминантами, но также разнообразен по О-серотипам и, таким образом, представляет потенциально большую опасность для человека.
Пути передачи и и ф е к ц и и о т животных к человеку. Определив резервуары резистентных к антибиотикам Е.
Не исключена возможность перекрестного заражения от животных других видов, так как различных животных убивали одни и те же люди, хотя и в разных частях бойни.
В таблице 26.9 приведены обобщенные данные по обнаружению чувствительных и резистентных к антибиотикам О-серотипов Е. coli у животных и на их туше при убое. Большая часть всех О-серотипов была обнаружена как в кале, так и на туше каждого вида животных, что является подтверждением возможности загрязнения мяса кишечной флорой в условиях обычных боен.
coli. Следовательно, будут приветствоваться любые попытки сократить общее число резистентных штаммов Е. coli, поступающих в организм людей. Этого можно добиться за счет скрупулезного в каждом отдельном случае применения антибиотиков в ветеринарии и медицине. Имеющиеся данные говорят в пользу решения Шванновского комитета о запрещении использования клинических антибиотиков для стимуляции роста животных; возможно, это запрещение должно распространиться и на использование антибиотиков для профилактики и привести к значительно меньшему применению их во всех нетерапевтических целях.
Например, в опыте с подкормкой стрептомицином или ампициллином, в образцах выделений и печени цыплят удавалось обнаружить
« Отсчет времени после пероралыюго заражения 5. typhimurium суточных цыплят, содержавшихся затем три дня на рационе с добавкой антибиотика. Т — S. typhimurium, выделенный после обогащения среды селенитом или из обычной среды (Д). Графы, обозначенные символом > 1 пли > 50, —1 или 50 колоний и указывают на число S.
Обзор имеющихся по этой теме сообщений показывает, что за небольшим исключением соединения, полученные путем биоконверсии, менее активны, чем исходные вещества. В то же время некоторые продукты трансформации (такие, как б-аминопенициллано-пая кислота) являются очень подходящим «строительным материалом» при получении полусинтетических антибиотиков. Непосредственные продукты биологической трансформации, как правило, не находят себе применения.
Однако в комплексе эти вещества более активны и, как правило, обладают бактерицидным действием. Некоторые из этих препаратов широко используются в Европе, особенно виргиниямицин и пристинамицин для перорального применения. Они оказались исключительно активными против стафилококков и довольно успешно применяются при таких тяжелых стафилококковых инфекциях, как остеомиелиты. Кроме того, виргиниямицин применяют как добавку к корму.
Первые данные о взаимосвязи между фолиевой и фолиновой кислотами были получены в исследованиях Зауберлиха [82], который установил повышенное выделение фолиновой кислоты после введения фолиевой кислоты. В другой работе, проведенной на срезах печенки крысы, был сделан вывод о прохождении в
Уровень синергизма в определенной степени зависит также от конкретного препарата сульфонамида, он слабее проявляется в присутствии малоактивных препаратов.
Будет ли данное сочетание препаратов бактерицидным in vivo, неизвестно. Ясно одно, что это сочетание высокоэффективно при лечении многих инфекций, а обладает ли оно бактерицидным действием, это не главное для антибактериального препарата при его использовании с лечебными целями. Хотя очищение от инфекции и означает гибель вторгшегося микроорганизма, в действительности редко удается определить роль, которую выполняет антибактериальный препарат при уничтожении микробов, и естественные защитные механизмы хозяина.
Как и можно было ожидать, их. защитное действие не зависит от введения фолиновой кислоты [13, 46] или тимидина [20], так как из обычных патогенов только Sir. faecalis может использовать готовые фолаты, а тимидин быстро выводится из организма, и его концентрация в крови и моче составляет менее 0,05 мкг/мл [96].
Влияние комбинации препаратов на появление резистентных мутантов
Постепенно антибактериальные препараты стали использовать в комбинациях, особенно при лечении туберкулеза, с целью уменьшения скорости появления резистентных мутантов.
ТМП и сульфонамидрезистентные штаммы
Рациональность применения комбинации ТМП + СМЗ зависит от сульфонамида, который уменьшает количество дигидрофолата, синтезируемого заражающим микроорганизмом. Это, в свою очередь, приводит к снижению количества ТМП, необходимого для подавления роста микробов, за счет блокирования превращения фолатов в их активную форму. Поэтому целесообразность применения этой комбинации будет зависить от чувствительности конкретного микроорганизма к СМЗ, однако чувствительность в данном случае следует отличать от чувствительности к одному сульфонамиду.
сульфонамида, все же известно, что резистентные штаммы содержат измененные дигидроптероатсинтетазы. Так, у штамма Е. coli, ставшего резистентным к сульфонамидам в ходе
серийного пассирования, эти ферменты менее эффективно связывались с сульфонамидами, чем ферменты исходного штамма [77]. Установлено, что штаммы с генами или плазмидами резистентности к сульфонамиду имеют два сходных фермента. Одним и» этих ферментов является фермент, обнаруживаемый в чувствительных штаммах.
Он установил, что сульфона-миды значительно усиливают подавляющее действие ТМП на штамм Streptococcus faecalis, который обычно считается индифферентным к присутствию СМЗ. Аналогичные результаты, были получены в опытах с двумя сульфонамидрезистентными штаммами Е. coli (табл. 5.3).
Стимулирующее действие СМЗ также удалось показать методом диффузии. Хотя на пластинке, для определения чувствительности к сульфонамиду вокруг диска зоны ингибирования Streptococcus faecalis не образовывались, все же вокруг диска, содержащего 23,75 мкг СМЗ j-f- 1,25 мкг ТМП, зоны ингибирования роста были
Аналогичные результаты были получены с сульфонамидрези-стентными штаммами Е.
Затем (по возрастанию мутности) измеряли время, которое требовалось для восстановления плотности культуры после ее разбавления бульоном без препарата. Таким образом, по величине времени, необходимого для восстановления плотности культуры, можно было установить любую разницу в антибактериальной активности между комбинацией и отдельными препаратами. Полученные результаты приведены в таблице 6.2.
При концентрациях препаратов, превышающих значения МИК, присутствие избытка СМЗ не приводило к увеличению времени восстановления плотности культуры после контакта с одним ТМП, более того, при суб-МИК-концентрациях было установлено небольшое дополнительное подавление роста.
Несмотря на неодобрение многих авторитетов, применение комбинации антибиотиков в клинической практике стало совершенно-обычным. В основе комбинированной терапии лежит идея расширения антибактериального спектра действия, причем во многих: случаях допускается возможность взаимодействия веществ, создающих тем самым синергидный эффект. Пенициллины часто комбинируют с другими антибиотиками, и в данном сообщении приведены примеры антибактериального синергидного действия комбинаций пенициллинов.
faecalis и ее повышение в комбинации с аминогликозидами достаточно детально показана на рисунке 7.1 при действии комбинаций амоксициллин -j- стрептомицин и амоксициллин + канамицин на стрепто-мицинорезистентный штамм Str. faecalis 816 (МИК стрептомицина > 5000 мкг/мл). Амоксициллин проявлял бактерицидную активность в концентрации 1,0 мкг/мл в течение первых 6 ч и снижал число живых клеток на 99,9 %, после чего происходило восстановление роста до видимого уровня.
Высокую эффективность бактерицидного действия низина на вегетативные клетки можно объяснить изменением поверхностного натяжения цитоплазматической мембраны, что приводит к нарушению клеточной проницаемости и как следствие этого к бактерио-лизису. Кроме того, низин может ин-гибировать синтез жестких структур клеточной ткани В. stearother-mophilus, что было установлено при изучении ингибиторов синтеза пеп-тидогликанов [87].
Кроме того, влияние активности воды на восстановление после нагревания зависело от вида тест-микроба: так, в опыте с использованием метода нагревание — восстановление Salmonella senftenberg не зависело от уменьшения активности воды. Другие ученые исследовали двойное действие стресс-факторов: нагревания и рН [37], нагревания и протективных веществ [47], нагревания и химических веществ [67], нагревания, величины рН и концентрации NaCl [70], причем каждый фактор раздельно и в комбинации.
Приведенные результаты тем не менее оказались не столь однозначными, как у Других авторов [6], когда из 89 выделенных из сыра штаммов, вызывающих отравления, 64 были отнесены к бычьему фаготипу 42D. Сыр стилтон чаще всего перекладывается на ранней стадии созревания, однако источником стафилококков, о чем можно судить По умень-
шению их числа и набору фаготипов, могут быть выжившие микроорганизмы из сырого молока.
Штаммы культивировали в 10 % -ном разведенном сухом снятом молоке при температуре 22 °С в течение 6 дней при заражающей дозе 104 клеток/мл. Молоко было забуферено фосфатным буфером в диапазоне рН 5—6 с интервалом 0,2 единицы рН. Результаты опытов показали (табл. 10.3), что только штамм человеческого типа вызывает сдвиг рН. Во всех образцах при исходном рН выше 5,2 конечная величина рН варьировала, но не превышала значения 6,3.
coli, все же они не исключают токсичности и SO3 . Из приведенных результатов можно сделать следующий вывод: при данных значениях рН в бульоне, использованном в качестве среды в этих опытах (рис. 11.5 и 11.10), и, следовательно, в большинстве типов мяса и мясопродуктов, консервированных S02, концентрация свободной молекулярной двуокиси серы очень невелика.
Поэтому токсическим фактором, ответственным за наблюдаемое изменение микрофлоры в консервированных добавлением S02 сосисках, вероятно, является комбинация HSOJ и SO3 , не оказывающая значительного влияния на рост М.
В данной статье будут обобщены сведения о восстановлении (оживлении) микроорганизмов, поврежденных действием химических веществ и антибиотиков, а также будет рассмотрен ряд оригинальных работ по оживлению микроорганизмов, поврежденных этими веществами.
Эффективность применяемых антибактериальных веществ обычно оценивается только по количеству живых и мертвых микроорганизмов в общей популяции. Информация становится более подходящей, если подсчитать числа уцелевших клеток за определенные интервалы времени и отложить на графике десятичные логарифмы этих чисел против времени обработки, как это обычно делается при изучении динамики гибели популяции клеток, подвергнутых действию физических факторов, например нагревания.
Ферментативная инактивация была с успехом использована для некоторых пенициллинов и цефалоспоринов ((3-лактамов), однако при использовании |3-лактамаз следует проявлять внимание, так как не все |3-лактамазы разрушают любой (3-лактамный антибиотик. Лактамазы вырабатываются различными бактериями. Резистентность бактерий к другим антибиотикам, например к хлорамфениколу и некоторым аминогликозидам (стрептомицину), также может быть следствием выработки ферментов, разрушающих эти вещества.
новской концепции использования лечебных препаратов и антибактериальных кормовых добавок.
В соответствии с рекомендацией Шванновского комитета применяемые в качестве кормовых добавок антибактериальные вещества должны отвечать следующим требованиям:
1) давать экономическую выгоду при применении в животноводстве;
2) не должны совсем или крайне мало применяться как терапевтические препараты в медицине и ветеринарии;
3) не снижать эффективности предписанного лечебного антибиотика или антибиотиков в результате индуцирования резистентных штаммов микроорганизмов.
Отрицательные моменты при проведении профилактики в период лактации: 1) необходимо выявлять клиническую форму заболевания; 2) трудно контролировать длительность и эффективность лечения; 3) молоко необходимо выбраковывать (длительность такого периода варьирует); 4) зараженных коров необходимо содержать отдельно; 5) при стафилококковых инфекциях лечение относительно неэффективно.
Современная система содержания свиней, при которой не исключается контакт животных всех возрастных групп с бактериями, вирусами, микоплазмами и др.
Системы для борьбы с болезнями уже разработаны и проявляют свою высокую эффективность, особенно в случае метаболических и паразитарных болезней, если их применять со знанием дела. Однако в случае инфекционных болезней взаимосвязь между условиями среды, экологией инфекционных агентов и их хозяином-животным остается более сложной и, как правило, менее изученной. Меры борьбы, очевидно, нельзя считать абсолютно эффективными, если они базируются на предварительных данных, и в отдельных случаях наших знаний может оказаться совершенно недостаточно, чтобы разработать приемлемую систему борьбы с болезнями в настоящее время.
В действительности указанные условия создают не больше проблем для ветеринарного специалиста, чем необходимость ежедневно ставить немедленный диагноз клиническим симптомам, которые обнаруживаются при полном обследовании больного животного. Выбор антибиотика для каждого конкретного Случая основывается на учете разнообразных факторов, исходя из которых клиницисты делают заключение о данном заболевании и взаимосвязи его с окружающей средой.
В то же время, как отмечает Функе [12], с которым автор данной главы полностью согласен, мы не должны полностью полагаться на терапию в сухостойный период коров, искусственно маскируя и снижая требования к практике правильного содержания молочного скота.
В этой области у меня нет специальных знаний, однако, по мнению всех, кто занимался применением препаратов с этой целью, имеют значение следующие два обстоятельства: 1) пригодность коммерчески доступного препарата должна быть достаточно хорошо оценена в полевых условиях, а не только на основании опытов in vitro, как это часто бывает; 2) препарат должен быть недорогим.
Ингибирующий уровень пенициллина в пределах 1—16 ИЕ/мл теперь часто выражается в микрограммах, также далека от стандарта унификация методов определения резистентности. В Северной Ирландии применяют диски, содержащие 1,5 ИЕ, в Германии и Австрии—10 ИЕ, а в Нидерландах и Дании—1,0 ИЕ.
Количество стафилококков, резистентных к стрептомицину, также увеличилось, и, по данным Вилсона (личное сообщение) [49], оно зависит от масштабов применения антибиотика.
Но самое важное состоит в том, что после терапии в сухостойный период в большинстве стад появляются L-формы Strep, agalactiae, поэтому практика лечения коров в сухостойный период полусинтетическими пенициллинами, по мнению некоторых исследователей, должна быть пересмотрена [51].
Не менее важное значение приобретает знание экологии грамотрицательных бактерий, и почему именно условия их развития стали наиболее важным фактором за последние 6 лет.
Для этого штамма ЛДбо в опыте на телятах при пероральном заражении составила 5 X 108 микробных клеток. С целью получения стабильно высокой смертности, необходимой для сравнения режимов лечения на довольно небольших группах животных (максимально 35 телят), в опытах по химиотерапии для заражения применяли 100 ЛДбп. Стандартный курс лечения состоял из пяти ежедневных доз препарата; первую дозу вводили через 44 ч после заражения, так как к этому
времени почти у всех телят отмечались сильная лихорадка и тяжелые энтериты.
Мази должны выпускаться в форме, удобной для применения даже неквалифицированным персоналом, так как чаще всего они используются фермерами или скотоводами, а не ветеринарными врачами. Чаще других для введения антибиотиков применяют трубки с поршнем или шприцы, которые должны быть пригодны для наполнения препарата; в препарат не должны попадать токсические вещества, остающиеся после дезинфекции шприца.
По клиническим данным в 52 из 58 случаев (90 %) лечение оказалось успешным [2]. Таким образом, определение чувствительности с применением дисков, содержащих соответствующие комбинации антибиотиков, может более точно прогнозировать клинические результаты применения препаратов.
В этих же опытах 15 из 15 изолятов, резистентных к пенициллину и стрептомицину, взятых отдельно, оказались чувствительными к их комбинации, тогда как 5 из 23 микроорганизмов, чувствительных к обоим лекарствам по отдельности, не поддавались воздействию комбинированной терапии.
Вызываемое плесенью перегревание зерна имеет нежелательные последствия и требует значительных экономических затрат на проведение мер, предотвращающих порчу зерна. Спорадические случаи микозов и микотоксикозов у животных и людей обычно связаны с нарушением условий хранения зерна. Поражение плесенью может случиться при любой системе хранения зерна, однако влажное зерно из-за высокого содержания в нем влаги может быть более предрасположенным к воздействию микроорганизмов.
Скармливание обработанного зерна не влияет на состав молока, хотя ожидалось снижение его жирности, так как известно, что жирность молока снижается при скармливании кормов, которые повышают долю пропионовой кислоты по отношению ко всем кислотам рубца. Существует также мнение, что более тонкое измельчение других кормов, входящих в рацион, может оказать большее влияние на жирность молока, чем прямое добавление относительно небольшого количества пропионовой кислоты.
Результаты оценить оказалось трудно, так как не были выявлены взаимодействующие комбинации и не наблюдалось очевидного синергидного эффекта, например большего, чем для любого из трех наиболее эффективных препаратов: хлорамфеникола, стрептомицина и тетрациклина.
Несколько более усовершенствованный прием был использован Фишером при изучении 17 штаммов [1]. При этом 1мл 6-часовой культуры смешивали с 9 мл предназначенного для определения чувствительности диагностического агара фирмы «Оксоид» (DST СМ 261), охлаждали и оставляли при 4°С на 1 ч для диффузии антибиотиков.
Длительное пероральное введение антибиотиков создает исключительные условия для выработки резистентности к лекарственным препаратам. Кроме того, это способствует длительной персистенции резистентных штаммов после снятия селектирующего фона антибиотиков. Постоянный контакт с антибиотиками стабилизирует резистентные микроорганизмы и делает их частью обычной микрофлоры кишечника. Описанная ситуация у поросят и телят указывает на то, что постоянное (в течение многих лет) введение антибиотиков привело к возникновению резистентной микрофлоры, которая, без сомнения, передается из поколения в поколение, причем резистентные серотипы стабилизируются и чаще всего насыщают кишечную микрофлору.
Количество резистентных к антибиотикам форм Е. coli. Хотя резистентность к антибиотикам может передаваться всеми колиба-ктериями, однако культура Е. coli как отдельный вид была изучена по ряду причин. Во-первых, к этому виду относятся возбудители заболеваний человека и животных; во-вторых, что имеет особый практический смысл, возможность использовать метод серотипнрования для идентификации штаммов Е.
В то же время из одного образца кала от животных (телят, свиней и птицы) постоянно вы-
деляется множество О-серотипов бактерий (табл. 26.5). Поэтому животный резервуар штаммов не только богат R-детерминантами, но также разнообразен по О-серотипам и, таким образом, представляет потенциально большую опасность для человека.
Пути передачи и и ф е к ц и и о т животных к человеку. Определив резервуары резистентных к антибиотикам Е.
Не исключена возможность перекрестного заражения от животных других видов, так как различных животных убивали одни и те же люди, хотя и в разных частях бойни.
В таблице 26.9 приведены обобщенные данные по обнаружению чувствительных и резистентных к антибиотикам О-серотипов Е. coli у животных и на их туше при убое. Большая часть всех О-серотипов была обнаружена как в кале, так и на туше каждого вида животных, что является подтверждением возможности загрязнения мяса кишечной флорой в условиях обычных боен.
coli. Следовательно, будут приветствоваться любые попытки сократить общее число резистентных штаммов Е. coli, поступающих в организм людей. Этого можно добиться за счет скрупулезного в каждом отдельном случае применения антибиотиков в ветеринарии и медицине. Имеющиеся данные говорят в пользу решения Шванновского комитета о запрещении использования клинических антибиотиков для стимуляции роста животных; возможно, это запрещение должно распространиться и на использование антибиотиков для профилактики и привести к значительно меньшему применению их во всех нетерапевтических целях.
Например, в опыте с подкормкой стрептомицином или ампициллином, в образцах выделений и печени цыплят удавалось обнаружить
« Отсчет времени после пероралыюго заражения 5. typhimurium суточных цыплят, содержавшихся затем три дня на рационе с добавкой антибиотика. Т — S. typhimurium, выделенный после обогащения среды селенитом или из обычной среды (Д). Графы, обозначенные символом > 1 пли > 50, —1 или 50 колоний и указывают на число S.