Один тип антибактериального синергизма связан с применением двух антибактериальных препаратов, действующих на совершенно разные мишени в бактериальной клетке. Это особенно характерно для комбинации сульфонамид—триметоприм, которая успешно разработана фирмами «Роче продакт» и «Барроуге Велком» и детально описана в последующих статьях.
Второй тип синергизма относится к двойной атаке на одну ферментную систему, выполняющую конкретные функции в клетке, например синтез клеточной стенки.
д., способных образовывать антибиотики.
Избирая первый путь, необходимо более тщательно исследовать антибиотикообразующую способность уже известных продуцентов с целью выделения минорных компонентов из культуральной жидкости и сравнения их активности с активностью основных компонентов. Например, видимо, лишь один из 14 минорных компонентов гентамицинового комплекса ..может обладать примерно таким же терапевтическим потенциалом, как и очень эффективный гентамицин Сь
Среди недостатков у каждого из этих путей следует отметить проблему получения в достаточном количестве очищенного антибиотика для изучения его терапевтической эффективности и фармакологических свойств.
Анализ содержания препаратов в плазме крови показал, что они содержатся в достаточно эффективном соотношении и это соотношение их концентраций не изменяется в интервалах между приемом лекарства [1]. Все это позволило использовать ко-тримоксазол против большого числа инфекций, а именно при лечении респираторных заболеваний, исходя из активности комбинации против стрептококков, пневмококков и Haemophillus, при менингитах, благодаря активности против пневмококков, Haemophillus и Neisseria miningitidis.
При введении ТМП с бульоном наблюдается немедленный эффект, так как сразу достигается его ингибирующая концентрация в культуре и на действие препарата указывает прогрессирующее
ние мутности (рис. 6.5). В опытах с одновременным введением ТМП и СМЗ либо в виде порциальной инъекции, либо непрерывно с бульоном кривая мутности культуры всегда была идентична такой же кривой при введении одного ТМП. Иначе говоря, добавка СМЗ недостаточна для того, чтобы обеспечить гидрокинетическое очищение от инфекции.
Кроме того, мециллинам обладает характерным типом действия, который легко отличить по морфологическим изменениям, вызываемым у чувствительных бактерий. Под действием мециллинама бак-
термальные клетки превращаются в крупные сферические формы, относительно более стабильные в нормальной среде, чем сферо-пласты, индуцированные пенициллинами[5, 20].
Поскольку мециллинам и пенициллины действуют на разные участки клетки, то комбинация этих соединений должна была бы проявлять синергидное действие [19, 26, 36].
Эти тринадцати-членные циклические структуры с одним атомом серы впервые для пептидной химии обнаружены в низине. Два остальных кольца низина имеют больший размер и состоят из 16—22 членов. Это наводит на мысль, что низин действует конкурентно с такими метаболически важными веществами, как SH-содержащие ферменты, глютатион или коэнзим А (рис. 8.1).
Установлены также и стадии биосинтеза двух редких аминокислот: предшественниками лантионина являются серии и цистеин, а В-метиллантионина — треонин и цистеин [60].
Селекционированы мутанты, образующие в 10 раз большее количество низина; последнее особенно важно в производственных целях. Биосинтез низина в производственных условиях сильно зависит от довольно высокой чувствительности продуцирующих низин стрептококков к бактериофагам. Вызванные бактериофагами неполадки возникают чаще всего при изготовлении сыра в открытых чанах [91]. Некоторые продуцирующие низин штаммы Str.
Особенно это касается новых разработок по распределению и хранению продуктов, например при торговле через торговые автоматы.
Из бекона, обработанного низином, были выделены резистентные к низину мезофильные микрококки и лактобациллы [27], однако следует отметить, что штаммы этих видов как продуценты низиназы, как правило, обладают естественной резистентностью к низину. В то же время имеются сообщения, что селекционированный резистентный к низину штамм В.
8.7) [101]. Изучено также образование С02 резистентными к низину и родительскими штаммами P. shermanii, которые культивировали на бесклеточных субстратах, подвергнутых ферментации различными контаминирующими бактериями и бактериями закваски [63., 83].
В аминокислотном составе экстрактов из чувствительных и резистентных к низину клеток Str. lactis установлено некоторое различие. Наиболее примечательный факт состоит в том, что у резистентных к низину штаммов больше треонина, валина и аспараги-новой кислоты (предшественника треонина); эти аминокислоты необходимы для биосинтеза цитоплазматических белков бактерий [102].
Опытные партии сыра с помощью закваски из штаммов L. acidophilus и Str. lactis var. taette,
а — влияние НП + НР-заквасок на качество сильно загрязненных бактериями сыров (700 000 колиформ/г и 10—100 споровых форм/г); б — влияние низина на качество сыра; 1, II, III, Б (брак) — класс качества сыра.
резистентных к 200 ИЕ/мл низина, показали, что первый штамм не выдерживает синергидного действия низкого уровня низина (20 ИЕ/мл) и тепловой обработки при 55 °С (т.
Недостатки подобных опытов хорошо известны. В указанных опытах главное внимание было уделено органолептическим качествам и длительности хранения продуктов, обработанных низином. Меньше внимания было уделено очень важной проблеме увеличения питательной ценности продуктов, обработанных низином, по сравнению с обычными. Сделано также несколько экономических анализов применения низина с учетом всех вышеотмеченных его преимуществ.
Из сказанного следует, что, владея способом регистрации восстановления, можно испытывать действие различных ингибиторов на клетки по их восстановлению, а также понять специфику восстановительных процессов и установить природу самого повреждения.
Вопросы, связанные с повреждением и восстановлением микробов, быстро проникли во все области микробиологии пищевых продуктов. Внимание гигиенистов сосредоточилось вокруг того факта, что стандартный метод подсчета микроорганизмов на селективной среде не позволяет обнаружить все попавшие в пищу живые патогенные микроорганизмы.
Они внимательно рассмотрели механизмы повреждения и восстановления. Алвуд и Рассел [4] также касаются механизмов теплового повреждения и довольно обстоятельно проанализировали раннюю литературу. Буста [11] суммировал данные относительно практического значения индуцированных стрессом повреждений и дал первый обзор по обработке спор и их повреждению. Рей и Спек [59] представили тщательный анализ причин повреждений, вызываемых замораживанием и оттаиванием.
Несколько лет назад 0,1 %-ная пептонная вода была рекомендована в литературе как разбавитель для Ps. fluorescens и была установлена ее пригодность именно для данного штамма, однако разбавитель не отвечал своему назначению, если эти организмы были повреждены.
Имеются данные о тепловом действии подогретого агара, используемого для заливки чашек [59].
В то же время тепловое воздействие подогретого агара можно исключить и тем самым увеличить эффективность подсчета колоний на агаре, если клетки высевать на поверхность агара, а не заливать им [46].
coli, и в зависимости от результатов пробирки считали положительными или отрицательными. Такой частично автоматизированный быстрый метод наиболее применим для Е. coli и позволяет подсчитать число микроорганизмов, поврежденных в процессе переработки продуктов.
Кафедра микробиологии факультета прикладной биохимии и питания сел ьскохозяйствеиной школы Ноттингемсного университета, Саттон Бонингтон
Вспышки стафилококкового отравления в результате бактериального загрязнения сыра хорошо известны, но в настоящее время они случаются довольно редко, так как пастеризация молока, перед изготовлением сыра стала обычной практикой [18].
По полученным результатам вычерчивали график гибели микроорганизмов в зависимости от температуры. Для всех штаммов эта зависимость оказалась линейной, причем статистический анализ результатов не выявил заметных различий между шестью штаммами (Р > 0,05 %). В то же время величина рН очень сильно (Р<С0,01) Влияла на снижение терморезистентности штаммов, как это показано на рисунке 10.3, где величина Z отложена против рН.
Перед добавлением к основному объему последние два раствора не смешивали до полного растворения в них добавленных веществ, чтобы исключить возможные потери СОг. Во всех карбонизированных пробах была одинаковая концентрация бикарбоната (276 мг), которой по расчетам оказалось достаточно для получения насыщенного приблизительно 25%-ного раствора двуокиси углерода при 25 °С и рН 7. Пробы устанавливали в барабанный инкубатор при 22 °С и непрерывно перемешивали в течение всего опыта по определению кривой роста микроорганизмов.
Сульфо-намиды и сульфоны конкурируют с р-аминобензойной кислотой при биосинтезе фолиевой кислоты, поэтому р-аминобензойная кислота является эффективным нейтрализатором при обработке бактерий сульфонамндами и сульфонами. Механизм действия на антибиотики других нейтрализаторов пока не поддается простому объяснению; двухвалентные катионы в какой-то степени активны
против некоторых тетрациклинов [44, 85, 136], что можно связать с тенденцией тетрациклинов образовывать хелатные комплексы с ионами металлов [93].
coli — а) КВА; б) декстрозо-желчный агар с фиолетовым красным (ДЖФК) (ДЖФК : Оксоид),
Инкубацию во всех средах проводили при 30 °С в течение двух дней, кроме ОПА (22 °С в продолжение пяти дней) и. ДЖФК при 37 °С.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
На рисунках 12.2—12.9 приведены полученные результаты.
Подсчет необработанных клеток. В отдельных случаях отмечены значительные различия при подсчете клеток на селективной и неселективной средах, которые наблюдались до внесения антибактериальных веществ (рис.
Положение с такими патогенными микроорганизмами, как Staph, aureus, салмонеллы, патогенные серотипы Е. coli и, возможно, Mycoplasma gallisepticum, которые вызывают заболевания у животных, весьма неоднозначно. У этих микроорганизмов отмечается преобладающее возникновение штаммов не только с единичной, но и множественной резистентностью. Вполне возможно, что химиотерапия заболеваний, вызванных этими штаммами микроорганизмов, будет усложнять ситуацию по резистентности, несмотря на значительные изменения в современной тенденции применения антибактериальных веществ.
Поэтому бактериологическое исследование образцов и определение их чувствительности к антибиотикам должны стать обычным делом. Даже если последние данные по чувствительности соответствуют выбранному лечению, а реакция животного указывает на выздоровление, все же только бактериологические данные могут указать на источник заболевания, особенно в случае маститов.
Определение чувствительности к антибиотикам при заболевании скота ограничивается в основном случаями заражения вымени и энтероинфекциями, когда можно легко отобрать материал для исследования.
Во втором обследовании, проведенном на 526 стадах меньшего размера, положительными на остатки антибиотиков оказались 0,71 % образцов молока и 7,6 %, стад соответственно.
Начиная с 1969 г. в районе Белфаста проводились постоянные обследования молочных стад, в ходе которых подсчитывались число соматических клеток Strep, agalactiae и остатки ингибирующих веществ. По полученным данным, используя метод Галлеслота и Хассинга, в 1974 г.
Определение времени всасывания антибиотика имеет существенное значение для создания его терапевтического уровня в вымени; если используются два или более антибиотиков, то важно, чтобы все компоненты мази диффундировали с одинаковой скоростью. Особое значение это имеет при применении препаратов с аддитивным или синергидным типом действия. Антибиотики могут действовать оптимально только в том случае, если они присутствуют в соответствующих пропорциях, поэтому количество выбранных антибиотиков и тип основания должны быть подобраны таким образом, чтобы гарантировать оптимальный уровень препарата in vivo.
Недавно был опубликован обзор по практическому применению препарата пропкорн , состоящего в основном из пропионовой кислоты [2]. В нем сообщалось о разработанной в Англии новой системе хранения влажного зерна и о некоторых существенных факторах, обусловливающих ее успешное применение.
Перед тем как более подробно рассмотреть этот метод и использование обработанного кислотой зерна, необходимо обратить внимание на другие условия.
Из всего 22-недельного периода исследования зерно, обработанное муравьиной и уксусной кислотами (0,5%), не поражалось плесенью лишь 2 недели. При аналогичной обработке изо-масля-ной кислотой зерно сохранялось до 9 недель, тогда как при обработке пропионовой кислотой отмечена полная защита зерна до конца срока исследования (22 недели).
Автором данной главы в условиях лаборатории были получены аналогичные результаты при испытании разных концентраций кислот, применяемых для обработки зерна (табл.
Для нагревания опытных пробирок, содержащих суспензию спор в концентрации примерно 106 спор/мл, использовали водяную баню с постоянной температурой. Через определенные интервалы времени пробирки вынимали и охлаждали в воде. После
этого с помощью стерильной пастеровской пипетки споры наносили на 1%-ный обычный агар и инкубировали в темноте при температуре 30 °С. Через 24 ч под микроскопом подсчитывали процент проросших спор.
В таком исследовании можно даже пойти дальше и аналогичным образом одну таблетку вещества А рассматривать как равную по массе 60 исходным таблеткам
этого вещества, а одну таблетку В — равной 20 таблеткам вещества В. Таким способом получают общие дозы. Для обозначения этого количества мы введем термин «стоп-доза». Таким образом, стоп-доза — это такое количество индивидуального вещества, которое способно вызвать данный антибактериальный эффект за определенное время.
Если эта сумма меньше 1, то мы говорим о синергизме, если больше — об антагонизме.
Существенный недостаток этого метода' состоит в том, что синергизм можно выразить в пределах от 0 до 1, тогда как антагонизму соответствует весь диапазон между 1 и бесконечностью. Симметричность диапазонов для антагонизма и синергизма может быть легко восстановлена, если количество по вертикальной оси откладывать не в стоп-дозах, а в логарифмах стоп-доз.
Если это время будет равно выбранному времени, то потенциальная активность смеси, рассчитанная по времени действия, является аддитивной.
Таким же способом этот метод. сложения показателей массы компонентов можно использовать при определении аддитивности, синергизма и антагонизма по величине антибактериального эффекта.
До сих пор мы имели дело со случаями, когда допускалась возможность определения количественного эквивалента для одной стоп-дозы смеси, состоящей из трех конкурирующих веществ.
Вертикальные линии показывают 95%-ные доверительные границы уровня. Ось у — свободная пенициллиновая кислота (мкг/мл сыворотки). Ось х — время после введения, ч.
ротки оказался исключительно простым приемом при работе с большинством видов животных в наших опытах. В случае использования препарата, предназначенного для применения разным видам животных, уровень его в крови необходимо предварительно оценить или на собаках, или на телятах.
Эта рекомендация была узаконена Английским правительством в марте 1971 г. Аналогичная проблема была изучена Управлением по продуктам и лекарствам США (сообщение 1972 г.) и ВОЗ (сообщение 1974 г.). В отличие от сообщения Шванновского комитета доклад Американского управления не приобрел силу закона, так как ко времени публикации этого хорошо документированного доклада появилось большое число дополнительных научных статей по резистентности к антибиотикам у животных, что подтвердило и показало значение результатов приведенных в приложении к упомянутому докладу и в обзоре Смита [25].
coli, резистентных к сравнительно редко используемому спектиномицину: все 27 резистентных к спектиномицину штаммов, выделенных от разных свиней, были одновременно устойчивыми и к стрептомицину. Последнее объясняется тем, что одна из форм определяемой плазмидной резистентности к стрептомицину зависит от действия аденилазы, которая, кроме стрептомицина, инактивирует и спектиномицин. Отсутствие штаммов Е.
Один тип антибактериального синергизма связан с применением двух антибактериальных препаратов, действующих на совершенно разные мишени в бактериальной клетке. Это особенно характерно для комбинации сульфонамид—триметоприм, которая успешно разработана фирмами «Роче продакт» и «Барроуге Велком» и детально описана в последующих статьях.
Второй тип синергизма относится к двойной атаке на одну ферментную систему, выполняющую конкретные функции в клетке, например синтез клеточной стенки.
д., способных образовывать антибиотики.
Избирая первый путь, необходимо более тщательно исследовать антибиотикообразующую способность уже известных продуцентов с целью выделения минорных компонентов из культуральной жидкости и сравнения их активности с активностью основных компонентов. Например, видимо, лишь один из 14 минорных компонентов гентамицинового комплекса ..может обладать примерно таким же терапевтическим потенциалом, как и очень эффективный гентамицин Сь
Среди недостатков у каждого из этих путей следует отметить проблему получения в достаточном количестве очищенного антибиотика для изучения его терапевтической эффективности и фармакологических свойств.
Анализ содержания препаратов в плазме крови показал, что они содержатся в достаточно эффективном соотношении и это соотношение их концентраций не изменяется в интервалах между приемом лекарства [1]. Все это позволило использовать ко-тримоксазол против большого числа инфекций, а именно при лечении респираторных заболеваний, исходя из активности комбинации против стрептококков, пневмококков и Haemophillus, при менингитах, благодаря активности против пневмококков, Haemophillus и Neisseria miningitidis.
При введении ТМП с бульоном наблюдается немедленный эффект, так как сразу достигается его ингибирующая концентрация в культуре и на действие препарата указывает прогрессирующее
ние мутности (рис. 6.5). В опытах с одновременным введением ТМП и СМЗ либо в виде порциальной инъекции, либо непрерывно с бульоном кривая мутности культуры всегда была идентична такой же кривой при введении одного ТМП. Иначе говоря, добавка СМЗ недостаточна для того, чтобы обеспечить гидрокинетическое очищение от инфекции.
Кроме того, мециллинам обладает характерным типом действия, который легко отличить по морфологическим изменениям, вызываемым у чувствительных бактерий. Под действием мециллинама бак-
термальные клетки превращаются в крупные сферические формы, относительно более стабильные в нормальной среде, чем сферо-пласты, индуцированные пенициллинами[5, 20].
Поскольку мециллинам и пенициллины действуют на разные участки клетки, то комбинация этих соединений должна была бы проявлять синергидное действие [19, 26, 36].
Эти тринадцати-членные циклические структуры с одним атомом серы впервые для пептидной химии обнаружены в низине. Два остальных кольца низина имеют больший размер и состоят из 16—22 членов. Это наводит на мысль, что низин действует конкурентно с такими метаболически важными веществами, как SH-содержащие ферменты, глютатион или коэнзим А (рис. 8.1).
Установлены также и стадии биосинтеза двух редких аминокислот: предшественниками лантионина являются серии и цистеин, а В-метиллантионина — треонин и цистеин [60].
Селекционированы мутанты, образующие в 10 раз большее количество низина; последнее особенно важно в производственных целях. Биосинтез низина в производственных условиях сильно зависит от довольно высокой чувствительности продуцирующих низин стрептококков к бактериофагам. Вызванные бактериофагами неполадки возникают чаще всего при изготовлении сыра в открытых чанах [91]. Некоторые продуцирующие низин штаммы Str.
Особенно это касается новых разработок по распределению и хранению продуктов, например при торговле через торговые автоматы.
Из бекона, обработанного низином, были выделены резистентные к низину мезофильные микрококки и лактобациллы [27], однако следует отметить, что штаммы этих видов как продуценты низиназы, как правило, обладают естественной резистентностью к низину. В то же время имеются сообщения, что селекционированный резистентный к низину штамм В.
8.7) [101]. Изучено также образование С02 резистентными к низину и родительскими штаммами P. shermanii, которые культивировали на бесклеточных субстратах, подвергнутых ферментации различными контаминирующими бактериями и бактериями закваски [63., 83].
В аминокислотном составе экстрактов из чувствительных и резистентных к низину клеток Str. lactis установлено некоторое различие. Наиболее примечательный факт состоит в том, что у резистентных к низину штаммов больше треонина, валина и аспараги-новой кислоты (предшественника треонина); эти аминокислоты необходимы для биосинтеза цитоплазматических белков бактерий [102].
Опытные партии сыра с помощью закваски из штаммов L. acidophilus и Str. lactis var. taette,
а — влияние НП + НР-заквасок на качество сильно загрязненных бактериями сыров (700 000 колиформ/г и 10—100 споровых форм/г); б — влияние низина на качество сыра; 1, II, III, Б (брак) — класс качества сыра.
резистентных к 200 ИЕ/мл низина, показали, что первый штамм не выдерживает синергидного действия низкого уровня низина (20 ИЕ/мл) и тепловой обработки при 55 °С (т.
Недостатки подобных опытов хорошо известны. В указанных опытах главное внимание было уделено органолептическим качествам и длительности хранения продуктов, обработанных низином. Меньше внимания было уделено очень важной проблеме увеличения питательной ценности продуктов, обработанных низином, по сравнению с обычными. Сделано также несколько экономических анализов применения низина с учетом всех вышеотмеченных его преимуществ.
Из сказанного следует, что, владея способом регистрации восстановления, можно испытывать действие различных ингибиторов на клетки по их восстановлению, а также понять специфику восстановительных процессов и установить природу самого повреждения.
Вопросы, связанные с повреждением и восстановлением микробов, быстро проникли во все области микробиологии пищевых продуктов. Внимание гигиенистов сосредоточилось вокруг того факта, что стандартный метод подсчета микроорганизмов на селективной среде не позволяет обнаружить все попавшие в пищу живые патогенные микроорганизмы.
Они внимательно рассмотрели механизмы повреждения и восстановления. Алвуд и Рассел [4] также касаются механизмов теплового повреждения и довольно обстоятельно проанализировали раннюю литературу. Буста [11] суммировал данные относительно практического значения индуцированных стрессом повреждений и дал первый обзор по обработке спор и их повреждению. Рей и Спек [59] представили тщательный анализ причин повреждений, вызываемых замораживанием и оттаиванием.
Несколько лет назад 0,1 %-ная пептонная вода была рекомендована в литературе как разбавитель для Ps. fluorescens и была установлена ее пригодность именно для данного штамма, однако разбавитель не отвечал своему назначению, если эти организмы были повреждены.
Имеются данные о тепловом действии подогретого агара, используемого для заливки чашек [59].
В то же время тепловое воздействие подогретого агара можно исключить и тем самым увеличить эффективность подсчета колоний на агаре, если клетки высевать на поверхность агара, а не заливать им [46].
coli, и в зависимости от результатов пробирки считали положительными или отрицательными. Такой частично автоматизированный быстрый метод наиболее применим для Е. coli и позволяет подсчитать число микроорганизмов, поврежденных в процессе переработки продуктов.
Кафедра микробиологии факультета прикладной биохимии и питания сел ьскохозяйствеиной школы Ноттингемсного университета, Саттон Бонингтон
Вспышки стафилококкового отравления в результате бактериального загрязнения сыра хорошо известны, но в настоящее время они случаются довольно редко, так как пастеризация молока, перед изготовлением сыра стала обычной практикой [18].
По полученным результатам вычерчивали график гибели микроорганизмов в зависимости от температуры. Для всех штаммов эта зависимость оказалась линейной, причем статистический анализ результатов не выявил заметных различий между шестью штаммами (Р > 0,05 %). В то же время величина рН очень сильно (Р<С0,01) Влияла на снижение терморезистентности штаммов, как это показано на рисунке 10.3, где величина Z отложена против рН.
Перед добавлением к основному объему последние два раствора не смешивали до полного растворения в них добавленных веществ, чтобы исключить возможные потери СОг. Во всех карбонизированных пробах была одинаковая концентрация бикарбоната (276 мг), которой по расчетам оказалось достаточно для получения насыщенного приблизительно 25%-ного раствора двуокиси углерода при 25 °С и рН 7. Пробы устанавливали в барабанный инкубатор при 22 °С и непрерывно перемешивали в течение всего опыта по определению кривой роста микроорганизмов.
Сульфо-намиды и сульфоны конкурируют с р-аминобензойной кислотой при биосинтезе фолиевой кислоты, поэтому р-аминобензойная кислота является эффективным нейтрализатором при обработке бактерий сульфонамндами и сульфонами. Механизм действия на антибиотики других нейтрализаторов пока не поддается простому объяснению; двухвалентные катионы в какой-то степени активны
против некоторых тетрациклинов [44, 85, 136], что можно связать с тенденцией тетрациклинов образовывать хелатные комплексы с ионами металлов [93].
coli — а) КВА; б) декстрозо-желчный агар с фиолетовым красным (ДЖФК) (ДЖФК : Оксоид),
Инкубацию во всех средах проводили при 30 °С в течение двух дней, кроме ОПА (22 °С в продолжение пяти дней) и. ДЖФК при 37 °С.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
На рисунках 12.2—12.9 приведены полученные результаты.
Подсчет необработанных клеток. В отдельных случаях отмечены значительные различия при подсчете клеток на селективной и неселективной средах, которые наблюдались до внесения антибактериальных веществ (рис.
Положение с такими патогенными микроорганизмами, как Staph, aureus, салмонеллы, патогенные серотипы Е. coli и, возможно, Mycoplasma gallisepticum, которые вызывают заболевания у животных, весьма неоднозначно. У этих микроорганизмов отмечается преобладающее возникновение штаммов не только с единичной, но и множественной резистентностью. Вполне возможно, что химиотерапия заболеваний, вызванных этими штаммами микроорганизмов, будет усложнять ситуацию по резистентности, несмотря на значительные изменения в современной тенденции применения антибактериальных веществ.
Поэтому бактериологическое исследование образцов и определение их чувствительности к антибиотикам должны стать обычным делом. Даже если последние данные по чувствительности соответствуют выбранному лечению, а реакция животного указывает на выздоровление, все же только бактериологические данные могут указать на источник заболевания, особенно в случае маститов.
Определение чувствительности к антибиотикам при заболевании скота ограничивается в основном случаями заражения вымени и энтероинфекциями, когда можно легко отобрать материал для исследования.
Во втором обследовании, проведенном на 526 стадах меньшего размера, положительными на остатки антибиотиков оказались 0,71 % образцов молока и 7,6 %, стад соответственно.
Начиная с 1969 г. в районе Белфаста проводились постоянные обследования молочных стад, в ходе которых подсчитывались число соматических клеток Strep, agalactiae и остатки ингибирующих веществ. По полученным данным, используя метод Галлеслота и Хассинга, в 1974 г.
Определение времени всасывания антибиотика имеет существенное значение для создания его терапевтического уровня в вымени; если используются два или более антибиотиков, то важно, чтобы все компоненты мази диффундировали с одинаковой скоростью. Особое значение это имеет при применении препаратов с аддитивным или синергидным типом действия. Антибиотики могут действовать оптимально только в том случае, если они присутствуют в соответствующих пропорциях, поэтому количество выбранных антибиотиков и тип основания должны быть подобраны таким образом, чтобы гарантировать оптимальный уровень препарата in vivo.
Недавно был опубликован обзор по практическому применению препарата пропкорн , состоящего в основном из пропионовой кислоты [2]. В нем сообщалось о разработанной в Англии новой системе хранения влажного зерна и о некоторых существенных факторах, обусловливающих ее успешное применение.
Перед тем как более подробно рассмотреть этот метод и использование обработанного кислотой зерна, необходимо обратить внимание на другие условия.
Из всего 22-недельного периода исследования зерно, обработанное муравьиной и уксусной кислотами (0,5%), не поражалось плесенью лишь 2 недели. При аналогичной обработке изо-масля-ной кислотой зерно сохранялось до 9 недель, тогда как при обработке пропионовой кислотой отмечена полная защита зерна до конца срока исследования (22 недели).
Автором данной главы в условиях лаборатории были получены аналогичные результаты при испытании разных концентраций кислот, применяемых для обработки зерна (табл.
Для нагревания опытных пробирок, содержащих суспензию спор в концентрации примерно 106 спор/мл, использовали водяную баню с постоянной температурой. Через определенные интервалы времени пробирки вынимали и охлаждали в воде. После
этого с помощью стерильной пастеровской пипетки споры наносили на 1%-ный обычный агар и инкубировали в темноте при температуре 30 °С. Через 24 ч под микроскопом подсчитывали процент проросших спор.
В таком исследовании можно даже пойти дальше и аналогичным образом одну таблетку вещества А рассматривать как равную по массе 60 исходным таблеткам
этого вещества, а одну таблетку В — равной 20 таблеткам вещества В. Таким способом получают общие дозы. Для обозначения этого количества мы введем термин «стоп-доза». Таким образом, стоп-доза — это такое количество индивидуального вещества, которое способно вызвать данный антибактериальный эффект за определенное время.
Если эта сумма меньше 1, то мы говорим о синергизме, если больше — об антагонизме.
Существенный недостаток этого метода' состоит в том, что синергизм можно выразить в пределах от 0 до 1, тогда как антагонизму соответствует весь диапазон между 1 и бесконечностью. Симметричность диапазонов для антагонизма и синергизма может быть легко восстановлена, если количество по вертикальной оси откладывать не в стоп-дозах, а в логарифмах стоп-доз.
Если это время будет равно выбранному времени, то потенциальная активность смеси, рассчитанная по времени действия, является аддитивной.
Таким же способом этот метод. сложения показателей массы компонентов можно использовать при определении аддитивности, синергизма и антагонизма по величине антибактериального эффекта.
До сих пор мы имели дело со случаями, когда допускалась возможность определения количественного эквивалента для одной стоп-дозы смеси, состоящей из трех конкурирующих веществ.
Вертикальные линии показывают 95%-ные доверительные границы уровня. Ось у — свободная пенициллиновая кислота (мкг/мл сыворотки). Ось х — время после введения, ч.
ротки оказался исключительно простым приемом при работе с большинством видов животных в наших опытах. В случае использования препарата, предназначенного для применения разным видам животных, уровень его в крови необходимо предварительно оценить или на собаках, или на телятах.
Эта рекомендация была узаконена Английским правительством в марте 1971 г. Аналогичная проблема была изучена Управлением по продуктам и лекарствам США (сообщение 1972 г.) и ВОЗ (сообщение 1974 г.). В отличие от сообщения Шванновского комитета доклад Американского управления не приобрел силу закона, так как ко времени публикации этого хорошо документированного доклада появилось большое число дополнительных научных статей по резистентности к антибиотикам у животных, что подтвердило и показало значение результатов приведенных в приложении к упомянутому докладу и в обзоре Смита [25].
coli, резистентных к сравнительно редко используемому спектиномицину: все 27 резистентных к спектиномицину штаммов, выделенных от разных свиней, были одновременно устойчивыми и к стрептомицину. Последнее объясняется тем, что одна из форм определяемой плазмидной резистентности к стрептомицину зависит от действия аденилазы, которая, кроме стрептомицина, инактивирует и спектиномицин. Отсутствие штаммов Е.